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1. 载体构建的基本流程

1、载体构建的基本流程

载体构建的基本流程主要包括目的基因的获取、载体的选择和准备、目的基因与载体的连接、重组子的筛选与鉴定以及重组载体的扩增和纯化等步骤。首先，要进行目的基因的获取。这是载体构建的第一步，也是最关键的一步。可以通过PCR扩增、基因文库筛选、化学合成等方法获取目的基因。

在点样和电泳过程中，技巧性地操作移液枪，如平稳、缓慢地插入，确保样品无气泡，是保证电泳效果的关键。最后，观察电泳结果并思考引物设计对构建载体的影响，这将有助于深化对PCR的理解和应用。同源重组构建载体是一个复杂的过程，PCR只是其中的第一步。熟练掌握PCR技术，为后续的基因操作打下坚实基础。

①用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制（称为克隆）。理想的运载体是质粒（plasmid），在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。

第一节 植物基因工程载体种类 根据其功能和构建过程，可分为以下种类。 （1）目的基因克隆载体：其功能是保存和克隆目的基因。与 微生物基因工程相似，通常是由多拷贝的E. Coli小质粒为载 体。 （2）中间克隆载体：是构建中间表达载体的基础质粒。

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