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1. 构建载体常用的是___型限制性内切酶

1、构建载体常用的是___型限制性内切酶

综上所述，构建载体常用的是Ⅱ型限制性内切酶，因为它们可以特异地切割DNA序列并产生适当的末端，以便与目的DNA片段连接。

III 型限制性内切酶，有专一的识别顺序，但不是对称的回文顺序，在识别顺序旁边几个核苷酸对的固定位置上切割双链。

利用限制性内切酶制备T载体利用限制性内切酶特异性强，一次酶切产量高，质量稳定，易于操作等特点。

在宿主细胞中能保存下来并能大量复制；（2）有多个限制性内切酶点，而且每种酶的切点最好只有一个，如大肠杆功就有多种限制性内切酶的单一识别位点，可适于多种限制性内切酶切割的DNA插入；（3）有一定的标记基因，便于筛选。如大肠杆菌pBR322质粒携带四环素抗性基因，就可以作为筛先的标记基因。

构建重组质粒时并不是只用同种限制酶切割目的基因和载体，虽然理论上本应如此，一般都用同种才会容易处理，但常见的也有将两种限制性内切酶，也就是不同的限制酶进行双酶切，最后也会产生互补的黏性末端。其实用同一种限制酶，也就是单酶切，去分别切割目的基因与运载体这种方法是最简单。

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