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1. ...利用RNAi技术研究该基因的功能?RNAi载体怎么构建?

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RNAi技术是一种利用RNA干扰的技术，可以用来研究基因的功能。要利用RNAi技术研究基因的功能，首先要构建RNA载体。首先，根据已知的DNA序列，对其进行反式转录，得到目标基因的mRNA序列，然后将mRNA序列进行剪切，得到短的RNA片段（siRNA），最后将这些siRNA片段结合到RNA载体上，就可以构建RNA载体。

“酶切-连接”方法是通常构建RNA干扰载体最常用的方法，被广泛应用于各种生物之中。其构建过程是：通过PCR方法得到目的基因的片段（添加了合适的酶切位点），使之正反相连形成顺式片段和反式片段。

任何植物、线虫、果蝇、脊椎动物的基因都可以通过RNAi技术使其发生表达沉寂，所以RNAi技术已成为后基因组时代生命科学研究的有力工具 。在水稻中利用RNAi技术来验证定位的基因 。

RNAi技术在基因功能的研究上有其独特的优点 ： 简单易行，容易操作。对于动物来说，只要饲喂或注射即可，对植物可采用金属插入或农杆菌介导法。RNAi技术在转染细胞后48小时即可抑制基因的表达。其缺点是 ： RNA容易降解，需要低温保存。RNAi机制可作为真核生物的基因免疫系统，抑制外源和内源有害基因的表达。

RNAi，即RNA干扰作用，是一种生物体内的自然机制，由小分子RNA（siRNA）介导，对基因表达产生调控作用。siRNA是一种特殊类型的双链RNA，长度通常在21至25个核苷酸之间，其序列与目标mRNA分子具有同源性。siRNA的分子结构特征包括5；端磷酸和3；端羟基，以及3；端的非配对碱基。

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