大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于质粒构建更换载体的问题，于是小编就整理了1个相关介绍质粒构建更换载体的解答，让我们一起看看吧。

1. 重组质粒更换载体

1、重组质粒更换载体

有些情况下，由于实验的需求，我们必须给重组质粒更换载体，为了使其标记颜色改变或者抗性改变或者其他，最简单的方法就是使用内切酶切下质粒中目标片段后，顺便用同样的内切酶切下新的载体，（这里要注意，新载体上有没有对应的酶切位点及其会不会切掉比较重要的组成部分）连接后使用。

质粒载体 即，在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因，以质粒为载体，将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞，进行重组、筛选、扩增的过程。重组质粒 有目的基因，有质粒，然后用酶使两者相接就是重组质粒，重组质粒是一个种动作，方法，也是一个名词。

首先，扩增出DNA片段，连接到中间载体上（比如说pEASY），然后转化到大肠杆菌中。此步骤在大肠杆菌中能够高保真性复制，提高碱基的保真性，另外也起到增加目的片段的浓度的目的。提到的质粒也方便测序（因为中间载体片段较小）。

选择合适的质粒载体：首先需要选择合适的质粒载体，考虑到外源基因的大小、表达强度和选择标记等因素。质粒是一种环状的DNA分子，可以在细胞内自主复制和表达外源基因，因此选择合适的质粒载体是进行同源重组构建质粒的第一步也是非常重要额一步。

如果要克隆较小的DNA片段（10kb）且结构简单，质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆，从原理上说是很简单的，先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段， 然后体外使两者相连接， 再用所得到重组质粒转化细菌，即可完成。

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