本篇文章给大家谈谈表达载体构建选择，以及表达载体选择时应主要考虑哪些因素对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。 今天给各位分享表达载体构建选择的知识，其中也会对表达载体选择时应主要考虑哪些因素进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！

1. [实用技巧] 构建基因过表达载体之设计引物详细步骤

1、[实用技巧] 构建基因过表达载体之设计引物详细步骤

首先，从权威的Gene数据库（6 图）中搜索并锁定人类p53基因，找到其对应的NM_xxxx编号，下载CDS序列，为后续操作奠定基础。选择适合的载体是关键，PCI-neo因其常见的应用而备受青睐，但详情将在后续章节中详述（2）。

现在我们就需要把SUN片段连到一个载体，用VectorNTI打开，研究一下用哪个酶处理，这个载体需要用Sma1这个酶切开，然后用SUN连上，替换切下来的ccdb，这里要用到两个酶，一个Sma1限制性内切酶切开，一个DNA连接酶把新片段连上，植物转基因载体和这些酶都是非常常用的试剂。

基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。 将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体， 首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。

载体构建目的 ①用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制（称为克隆）。理想的运载体是质粒（plasmid），在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。

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