dnaman已知序列画构建载体-已知dna的序列为
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1、如何用DNAMAN画载体图
一般常用的序列比对软件有DNAMAN和Chromas,当然,还有很多类似软件,大家可以根据个人习惯选择,在这里就不一一介绍了。
在创口上部菜单栏中找到有search 功能的按键,会弹出一个小文本框窗口,输入你的引物序列,然后让它寻找(search)。但是要注意引物有正义链与反义链输入的区别。不知道你的引物是普通的25个碱基,还是30个碱基以上的超长引物。后者引物可以用alignment(比对)试试。不过也要注意正义、反义链的输入。
测序得到基因序列后一般都需要进行序列比对,看和目的序列的差异情况,常用的软件有DNAman,还有invitrogen的vectorVI也不错。此外还可以直接在网上进行比对,推荐NCBI网站的BLAST可以直接网上进行。克隆至质粒载体中后集中测序〔9,10〕。
如果你的序列同源性不高,GC含量也还可以的话,可以使用一些经验性原则。引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。
第一步是将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其5′-羟基的保护基团DMT,获得游离的5′-羟基。
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