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怎么构建真核载体,构建真核表达质粒步骤

怎么构建真核载体,构建真核表达质粒步骤

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  1. shRNA真核表达载体构建YRBIO-shRNA表达系统

1、shRNA真核表达载体构建YRBIO-shRNA表达系统

YRBIO-shRNA表达系统的优点在于:其shRNA序列源于成熟的国际数据库,保证了质量,干扰效率高;实验者可以灵活构建一条或多条shRNA;启动子类型丰富,适应不同实验需求;载体既可作为普通载体,也能作为腺病毒包装的穿梭载体,利用腺病毒的特性进行高效研究。

此shRNA数据库亦有一套原装进口的shRNA表达系统相匹配,针对每个基因的一套shRNA序列均已构建至相应的shRNA表达载体上,可直接使用,整套产品均为原装进口。此系统中,装载shRNA序列的真核表达载体,同时也是YRBIO第三代慢病毒包装系统中的穿梭载体。

构建的shRNA真核表达载体或者mirshRNA真核表达载体,由于载体上均带有LR同源重组臂,所以这些载体均可作为YRBIO腺病毒包装系统中的穿梭载体使用。如果目的细胞质粒转染效率较低,则可直接以这些载体为基础包装腺病毒,利用腺病毒感染目的细胞。

其目标是在未来三年内,构建出覆盖人类和小鼠基因的庞大shRNA库,具体计划是每种生物总计15,000个基因的shRNA克隆。TRC的首批成果已经发布,包含了第1版的shRNA文库,计有35,000个克隆,其中人类基因的shRNA有5,300个,小鼠基因的shRNA则有2,200个。

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