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1. 基因表达载体的构建

1、基因表达载体的构建

切割质粒和目的基因的限制酶必须是同-.种酶，以获得相同的黏性末端，利于重组质粒的构建。插入的目的基因只是结构基因部分，其表达需要调控序列，因而用作载体的质粒的插入部位前须有启动子，后须有终止子。通过载体把目的基因片段导入活细胞。

在构建基因表达载体时要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。需要通过载体而不能直接将目的基因导入受体细胞的原因是基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子等结构，而目的基因没有。

基因表达载体是用来将外源基因导入宿主细胞并表达的一种DNA分子，它的构建过程需要遵循以下原则： 选择合适的载体：要根据不同的实验需求选择不同的载体，比如选择质粒、病毒、合成RNA等。选择载体需要考虑载体大小、复制能力、选择标记、特异性表达等因素。

目的基因重组表达载体的构建是将目的基因与适当的调控序列（如启动子、转录终止信号序列等）和标记基因连接在一起，形成重组表达载体。这个过程通常需要使用限制性核酸内切酶和连接酶等工具酶，以确保重组载体的正确性和稳定性。

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