构建的载体是否插入细胞,构建载体需要的条件
本篇文章给大家谈谈构建的载体是否插入细胞,以及构建载体需要的条件对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。 今天给各位分享构建的载体是否插入细胞的知识,其中也会对构建载体需要的条件进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!
1、怎样检验载体是否进入受体细胞?老师讲的是标记基因,具体步骤是什么...
最常用的是抗性筛选:载体上具有某种或某几种抗生素抗性基因,转化之后涂布在含有该抗生素的平板上,能长的就是载体进入了的细胞。挑选之后可以再利用菌落PCR或者扩增之后酶切,以鉴定目的基因是否也重组进去了,以排除载体自连的空载。最后用测序的方法检测是否有突变产生。
目的基因是要有特殊的标记基因的,导入受体细胞才能检验目的基因是否导入成功,如某段目的基因的抗青霉素的特性就可以用青霉素来检验。
因为标记基因和目的基因同位于运载体上,要导入都导入,要表达则都会表达。检测分三种,首先是通过对标记基因的检测,通常用DNA分子杂交技术,来检验标记基因是否成功的导入受体细胞。或者用分子杂交技术,来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验,来验证导入基因是否成功表达。
利用基因表达载体上的标记基因筛选:例如:标记基因是四环素抗性基因,就用含有四环素的培养基培养活细胞,如果细胞活着,证明基因表达载体已经进入。不存活,表明没有进入受体细胞。
关于构建的载体是否插入细胞和构建载体需要的条件的介绍到此就结束了,不知道你从中找到你需要的信息了吗 ?如果你还想了解更多这方面的信息,记得收藏关注本站。 构建的载体是否插入细胞的介绍就聊到这里吧,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于构建载体需要的条件、构建的载体是否插入细胞的信息别忘了在本站进行查找喔。
[免责声明]本文来源于网络,不代表本站立场,如转载内容涉及版权等问题,请联系邮箱:3801085100#qq.com,#换成@即可,我们会予以删除相关文章,保证您的权利。 转载请注明出处:http://www.mxzdyx.cnhttp://www.mxzdyx.cn/zbpj/10591.html