构建转基因载体的过程包括(如何构建转基因植物)
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1、制备转基因动物的五个环节?
1.目的基因的分离或合成;
2.将目的基因与载体DNA连接,构建重组DNA分子——表达载体;
3.将重组DNA分子导入受体细胞,并获得具有外源基因的个体;
4.转基因生物的检测与鉴定;
5.转基因生物的安全性评价。
优点是打破了常规育种难以突破的物种之间的界限,可以使原核生物与真核生物之间、动物与植物之间,甚至人与其他生物之间的遗传信息进行重组和转移。人的基因可以转移到大肠杆菌中表达,细菌的基因可以转移到植物中表达。
(1)外源目的基因的分离;
(2)外源基因与包含启动子、增强子、报告基因等元件的表达载体拼接重组;
(3)重组基因导入卵或胚胎干细胞;
(4)转基因胚胎的培养和移植;
(5)转基因胚胎发育和生长及转基因动物品系的筛选鉴定;
(6)外源基因在转基因动物的整合率和表达效率的检测。
转基因动物的制备在技术上大体包括几个步骤:
(1)载体的构建;(2)介质细胞的获得和培养;(3)DNA的导入;(4)正确重组细胞克隆的筛选;(5)将介质细胞参与个体发育,通过受精卵本身发育。
虽然如今转基因动物技术还在不断完善和革新的过程中,许多方面的应用尚未进入最终的产业化阶段,但随着理论和技术不断向前推进,动物转基因技术和转基因动物的制备必将对人类的疾病治疗、生产生活、社会发展等方面产生巨大的影响。
(1)载体的构建;
(2)介质细胞的获得和培养;
(3)DNA的导入;
(4)正确重组细胞克隆的筛选;
(5)将介质细胞参与个体发育,通过受精卵本身发育,或胚胎干细胞经显微操作技术注射进囊胚形成嵌合胚胎,或体细胞经显微操作技术进行核移植形成重构胚胎,然后移植进代孕动物子宫发育成个体;
(6)个体的交配繁殖与稳定
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