基因表达载体的构建用哪些酶(基因表达载体的构建需要的酶)
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1、基因表达载体的构建需要什么酶
基因表达载体时要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。过程:首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端(部分限制性内切酶可切割出平末端,拥有相同效果)。
在构建基因表达载体时要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。
构建基因表达载体必须的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶。基因是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。基因支持着生命的基本构造和性能。储存着生命的种族、血型、孕育、生长、凋亡等过程的全部信息。环境和遗传的互相依赖,演绎着生命的繁衍、细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程。
大致需要以下几种东西:(1)原始表达载体,用以把目的基因连上去;(2)扩增目的基因的模板;(3)核酸内切酶,用于切割载体和目的基因;(4)连接酶,用于连接目的基因和载体;(5)大肠杆菌感受态,用于转化筛选阳性克隆。
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