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1. 关于基因表达载体的构建

1、关于基因表达载体的构建

切割质粒和目的基因的限制酶必须是同-.种酶，以获得相同的黏性末端，利于重组质粒的构建。插入的目的基因只是结构基因部分，其表达需要调控序列，因而用作载体的质粒的插入部位前须有启动子，后须有终止子。通过载体把目的基因片段导入活细胞。

基因表达载体的构建，即目的基因与运载体结合，是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心，其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

构建基因表达载体的一般步骤如下： 选择合适的表达载体：根据需求选择合适的表达载体，常用的表达载体包括质粒、病毒等。需要考虑载体的大小、复制来源和选择标记等因素。 选取合适的启动子：启动子是调控基因表达的重要元件，选择合适的启动子能够实现目标基因的高效表达。

基因工程的操作程序中，构建基因表达载体是关键步骤。首先，我们需要明确四个基本元素： 目的基因：它是工程的核心，是希望在受体细胞中表达并发挥作用的特定遗传信息片段。 启动子：这个元件负责启动基因的转录，使目的基因得以表达。 终止子：它标志着转录的结束，保证了基因表达的精确性。

载体构建目的 ①用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制（称为克隆）。理想的运载体是质粒（plasmid），在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。

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