puc载体是由什么构建的-puc载体是什么载体
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1、puc载体类型?
PUC 载体是在PBR322 质粒载体的基础上,插入一个在其5‘端带有一段多克隆位点的lacZ#39;基因,发展成有双功能检测特性的新型质粒载体系列。它是由美国加州大学学者(University of California)于1987 年首先构建的,所以命名为PUC 系列载体。
常用的为高拷贝质粒(120~ 200个/ 细胞),含有多克隆位点,以满足多种内切酶切割的DNA段的克隆、PUC 质粒载体的结构类型包括以下四个组成部分:
(1)pBR322质粒的复制起点(ori);
(2)氨苄青霉素抗性基因(amp),但该核苷酸序列经过改造,没有原限制性核酸内切酶的单识别位点;
(3)大肠杆菌β-半乳糖酶基因(lacZ)的启动子及其编码a-肽链的DNA序列(即lacZ#39;基因);
(4)位于IacZ#39;基因中的靠近5#39;端引人了一段多克隆位点(MCS)区段,但它不会引起编码肽链功能的改变。
puc载体是细菌体内的环状DNA分子。
质粒也是作为细菌遗传载体的一部分,但通常其携带的基因对细菌而言必要性要比核内DNA的小很多。比如,抗性基因,荧光蛋白基因等等。
根据质粒随细胞分裂而分裂的次数,将其分为两个类型:
一类是严紧型质粒,当细胞染色体复制一次时,质粒也复制一次,每个细胞内只有1~2个质粒;
另一类是松弛型质粒,当染色体复制停止后仍然能继续复制,每一个细胞内一般有20个左右质粒。
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