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1. 为什么构建基因表达载体往往使用产生粘性末端的限制酶？

1、为什么构建基因表达载体往往使用产生粘性末端的限制酶？

构建基因表达载体时使用产生粘性末端的限制酶的主要原因是为了在连接过程中实现特异性的DNA片段拼接。

限制酶（也被称为切割酶）能够识别并切割DNA分子的特定序列。在构建基因表达载体的过程中，通常会使用两个不同的限制酶来切割载体DNA和目标基因的DNA。

这两个限制酶的选择要注意两点：

1. 限制酶的切割位点应该在所需连接的DNA片段的末端附近，这样切割后产生的粘性末端就能与其他DNA片段的粘性末端进行互衔接；

2. 两个限制酶的切割位点应该是兼容的，即它们的切割序列不仅需要互补，还要保证切割后产生的粘性末端能够互相配对。

通过使用产生粘性末端的限制酶，可以实现载体与目标基因的DNA片段的特异性连接。这种连接方式更加稳定和可靠，有助于构建稳定的基因表达载体。

构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生 （相同，不同）粘性末端的限制酶。

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