反义载体的构建,反义载体的构建方法
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于反义载体的构建的问题,于是小编就整理了1个相关介绍反义载体的构建的解答,让我们一起看看吧。
1、生物学EST是什么啊。详细的介绍一下?
首先,EST序列的测序,得到该基因的EST片段其次,生物信息学,用Go或者KEGG,分析该基因的功能分类,所在代谢途径等;通过NCBI Blastn,BlastX,tBlastn等比对与该基因同源性较高的基因序列和可能功能;通过ExPASY研究蛋白的特点,二级结构,三级结构等。
之后,根据已得到的信息,依据可能的功能设计细胞分子生物学实验,例如,1利用已知序列,通过RACE方法获得该基因的cDNA全序列,通过巢式PCR或者Tail PCR的方法获得全基因组序列及promotor序列2构建过表达载体,在生物体内过表达该基因,看是否获得可见表性 3构建反义RNA载体,或者RNAi载体,使该基因的表达沉默,看是否获得可见表性 4通过同源重组的方法,敲除该基因,看是否获得可见表性 5在该基因缺失的突变生物体中,过表达该基因,看表性能够得到互补t突变 6在该基因启动子后接上报告基因,观察该基因的表达位置 7在将该基因与报告基因后,进行亚细胞定位 8采用real-time-PCR的方法,观察该基因的表达模式 9采用基因芯片的方法,观察与该基因有关的基因 10采用酵母双杂交的方法,寻找与该基因相互作用的蛋白。 等等等等
到此,以上就是小编对于反义载体的构建的问题就介绍到这了,希望介绍关于反义载体的构建的1点解答对大家有用。
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