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1. 酵母双杂交的基本原理？

1、酵母双杂交的基本原理？

酵母双杂交技术是一种用于研究蛋白质之间相互作用的方法，其基本原理源于对真核生物基因转录调控机制的认识。许多真核生物的转录因子，如酵母的GAL4，都包含两个相互独立的功能结构域：DNA结合结构域（DNA-binding domain，BD）和转录激活结构域（Activation domain，AD）。这两个结构域分别负责与DNA上的特异序列结合以及启动相应基因的转录。

在酵母双杂交系统中，将已知的目标蛋白编码的DNA结合结构域与报道基因编码的转录激活结构域融合在一起，同时将另一个待测蛋白与报道基因编码的DNA结合结构域融合。如果这两个待测蛋白之间存在相互作用，那么它们会形成复合物，使得报道基因得以表达。

这种方法的优势在于可以快速验证已知蛋白之间的相互作用或寻找新的相互作用蛋白质，尤其在寻找蛋白质互作区域时表现出显著优势。其应用范围包括互作蛋白的筛选、蛋白互作的鉴定和验证、蛋白互作机理的探究等。

以下是我的回答，酵母双杂交的基本原理是利用酵母细胞中的两个互补的基因片段，将它们分别与两个感兴趣的蛋白质的编码基因融合，形成一个融合蛋白。其中一个融合蛋白包含了DNA结合域，另一个融合蛋白包含了激活域。

当这两个融合蛋白在酵母细胞中相互作用时，就会激活一个报告基因，从而实现对蛋白质相互作用的检测。

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