大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于pbwa遗传载体构建的问题，于是小编就整理了4个相关介绍pbwa遗传载体构建的解答，让我们一起看看吧。

1. 设计构建一个载体,将目的基因在植物根系表达并向根细胞外分泌。请详细...
2. 人工染色体的常用载体
3. 反向遗传学:8质粒系统拯救甲型流感病毒
4. 水杨酸能使植物获得系统获得性抗性,运用正向遗传学方法设计筛选具有系 ...

1、设计构建一个载体,将目的基因在植物根系表达并向根细胞外分泌。请详细...

Hua，难度挺大的，需要能控制合成具有外分泌功能的物质，该基因还只能在根系表达。这个问题直接从正面入手几乎是不可能的，虽然人类基因图谱早已侧出，但某个基因在什么时候什么地点表达，我们连门都还没找到。

将特定的外源基因构建在植物表达载体中并转入受体植物，并不是植物遗传转化的最终目的。理想的转基因植物往往需要外源基因在特定部位和特定时间内高水平表达，产生人们期望的表型性状。

由于启动子在决定基因表达方面起关键作用，因此，选择合适的植物启动子和改进其活性是增强外源基因表达首先要考虑的问题。

而且其载体质粒的构建也相对简单，因此也是目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法。

需要通过载体而不能直接将目的基因导入受体细胞的原因是基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子等结构，而目的基因没有。

2、人工染色体的常用载体

人工染色体载体实际上是一种“穿梭”载体，含有质粒载体所必备的第一受体（大肠杆菌）内源质粒复制起始位点（ori），还含有第二受体（如酵母菌）染色体DNA着丝点、端粒和复制起始位点的序列，以及合适的选择标记基因。

质粒、噬菌体、病毒载体。质粒：质粒是环状双链DNA分子，常见于细菌细胞内，也可通过人工方法导入其他生物体内。噬菌体：噬菌体是一种侵袭细菌的病毒，有高效表达和克隆扩增外源基因的能力。

酵母人工染色体（YAC）是人工染色体中能克隆最大DNA片段的载体，可以插入100-2000kb的外源DNA片段。YAC是有酵母的自主复制序列、着丝点、四膜虫的端粒以及酵母选择性标记组成的酵母线性克隆载体。

常用载体有质粒（一般克隆10bp左右的DNA片段）、噬菌体（与质粒相比，噬菌体可以克隆较大的DNA片段，噬菌体M13可以使DNA以单链 形式 被提取出来）、黏粒（可以克隆45bp左右的DNA片段）。

3、反向遗传学:8质粒系统拯救甲型流感病毒

其中，8质粒系统拯救甲型流感病毒最为广泛。8种质粒含有编码RNA聚合酶I可识别的启动子和终止子，在启动子和终止子之间分别含有每条流感病毒分段基因组的cDNA。

质粒救援转化是质粒转化枯草杆菌特有的方法。在此转化中，质粒以单链形式进入感受态细胞的。单体质粒DNA和感受态细胞接触时，在核酸酶作用下被切开，只有一条DNA链能够进入细胞。

反向遗传（Reverse genetic）技术作为一项新型技术，是从克隆的cDNA产生感染性RNA病毒的过程，实现了在cDNA 水平上对RNA病毒的操作，从而为病毒的功能基因组研究提供了强有力的手段。

甲型流感病毒是属于遗传物质为RNA的病毒，结构是外围的蛋白质外壳和内部的RNA，寄生生活，增值时，RNA注入要寄生的细胞中，指导合成RNA和蛋白质外壳，然后组装成一个个的甲型流感病毒，然后释放到细胞外。

甲型流感病毒可以轻易地进化和交换基因，病毒的遗传物质包括8个独立的RNA片段。为了复制自己，病毒进入到活细胞并在那里霸占细胞体系，使其制造新的病毒蛋白质和其他的病毒RNA拷贝。

4、水杨酸能使植物获得系统获得性抗性,运用正向遗传学方法设计筛选具有系 ...

水杨酸能使植物获得系统获得性抗性，现有水杨酸突变体，运用正向遗传学方法设计筛选具有系统获得性抗性的水杨酸突变体的方案。

水杨酸起到重要的信号作用。这里抗性的获得是由病原菌诱导的。因此植物诱导性抗性获得是由非病原物引起的，为茉莉酸和乙烯依赖型；系统获得性抗性是由病院物引起的，为水杨酸依赖型。

用作环氧树脂固化的促进剂，也可作为防腐剂。可用来制备水杨酸甲酯、水杨酸乙酯等合成香料。染料工业用作制备直接染料及酸性染料等的原料。还可用作橡胶防焦剂、消毒剂等。

为此，通过用能够激活抗性基因的化合物注射或喷洒植物，可以使植物获得免疫能力。水杨酸是公认的能激活植物抗性基因的有效物质。

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