大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于2000bp的片段好构建载体吗的问题，于是小编就整理了4个相关介绍2000bp的片段好构建载体吗的解答，让我们一起看看吧。

1. 2000bp测序选测通吗
2. 2000bp测序选测通吗
3. pet载体的插入片段一般有多大
4. 2000bp的cDNA好扩增吗

1、2000bp测序选测通吗

它测序选测通。2000bp测序，可以直接选择“测通”，选择测通是一个可行的方案，公司会在已经测出稳定结果的地方再合成一条引物继续往前测，直到测到载体序列为止，这样可以提高测序的准确性。

如果不放心，可以直接选择“测通”，公司会在已经测出稳定结果的地方帮你再合成一条引物继续往前测，直到测到载体序列为止。2K的带，选双向测序，自己拼接一下就可以了。

就是测通的意思。假如连到通用载体上，有测序的通用引物，分别从两端测。假如不测通那么公司就只从一端测，invitrogen是保证800bp准确。假如测通那么就从另一端加测，得到的结果进行序列拼接。

反向测序：就是用下游引物做测序引物往上测序。正向测序：就是用上游引物做测序引物往下测序。双向：就是正反两头同时测 测通：就是得到全场序列。一般超过1600bp的需要设计中间引物才可以测通。

2、2000bp测序选测通吗

它测序选测通。2000bp测序，可以直接选择“测通”，选择测通是一个可行的方案，公司会在已经测出稳定结果的地方再合成一条引物继续往前测，直到测到载体序列为止，这样可以提高测序的准确性。

如果不放心，可以直接选择“测通”，公司会在已经测出稳定结果的地方帮你再合成一条引物继续往前测，直到测到载体序列为止。2K的带，选双向测序，自己拼接一下就可以了。

就是测通的意思。假如连到通用载体上，有测序的通用引物，分别从两端测。假如不测通那么公司就只从一端测，invitrogen是保证800bp准确。假如测通那么就从另一端加测，得到的结果进行序列拼接。

反向测序：就是用下游引物做测序引物往上测序。正向测序：就是用上游引物做测序引物往下测序。双向：就是正反两头同时测 测通：就是得到全场序列。一般超过1600bp的需要设计中间引物才可以测通。

测一个反应就可以了，正向反向都可以的。先确定是不是你要的那个片段。要想得到的序列更加可靠的话，建议连接到T载体上，再拿去测序，也是一个反应就可以搞定。

3、pet载体的插入片段一般有多大

如果片段载体都回收到了，连接体系尽可能的减少载体量，比方说10微升体系，载体1到2微升，片段你可以加8微升甚至超过10微升都可以的。

切为两个片段，分别为188bp和5234bp。注意，这是切割的pET30a的空载体，要是你有外源片段就不一定了。

以前合过相应的引物，是针对pET30a的，5；端用的是BamH1，3；端用的是Xho1 现在要更换载体用pET28a。要插入的基因长度是684bp。

需要，作为运载体需要具备的条件就是含有启动子，标记基因，终止子，目的基因插入运载体后，细胞翻译蛋白质是利用运载体本身的启动子，终止子。如果不去掉就法翻译完全。而且，目的基因本身就不包含终止子。

根据插入片段序列设计一对 引物 ，然后以载体 质粒 进行 PCR扩增 ，接着进行 琼脂糖凝胶电泳 ，看扩增出来的片段的大小就行。

4、2000bp的cDNA好扩增吗

就长度来说，还是比较好扩增的。但是cDNA好不好扩增不是完全由长度决定，如GC含量，二级结构等影响可能更大。

就长度来说，还是比较好扩增的。但是cDNA好不好扩增不是完全由长度决定，如GC含量，二级结构等影响可能更大。

定量的长度一般在300bp以内，根据具体的检测项目决定长度。定性的最长能达到2K以上。一般情况来说，越短扩增效率越高。RNA做RT-PCR也一样。

如果同源性相当高，可以考虑同源克隆，在cds两端设计引物，你没有说清多长，如果2000bp还可以用一般tap酶扩增，如果太长了可以选在更强一些酶，也可以吧cds分成不同片段，设计多组重叠引物扩增出不同的片段在拼接。

不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率，末位碱基为A的错配效率明显高于其他3个碱基，因此应当避免在引物的3’端使用碱基A[3][4]。另外，引物二聚体或发夹结构也可能导致PCR反应失败。

到此，以上就是小编对于2000bp的片段好构建载体吗的问题就介绍到这了，希望介绍关于2000bp的片段好构建载体吗的4点解答对大家有用。