真核表达载体的构建优点,真核表达载体的缺点
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1、试述原核表达体系和真核表达体系各自的优、缺点。
【答案】:原核表达体系的优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产;不足之处是只能表达cDNA,不能表达真核基因组DNA表达的蛋白质不能形成适当的折叠或进行糖基化修饰;表达的蛋白质常形成不溶性的包涵体。
原核表达体系的缺点是:(1) 缺乏合适的转录后加工机制,因此不宜表 达真核生物基因组基因;(2) 缺乏合适的翻译后加工机制,因此表达产物不能适当折叠和修饰;(3) 很难在大肠杆菌表达体系中表达大量的可溶性蛋白。
原核的主要是指大肠杆菌表达系统了,优点就四个字,简单快捷,缺点也是蛮明显的:容易形成包涵体;折叠性差;很少的翻译后修饰;表达出来的蛋白可能没有活性。所以如果蛋白主要是用来做活性实验,建议还是用真核表达系统。
原核表达体系的缺点是:(1)缺乏合适的转录后加工机制,因此不宜表达真核生物基因组基因;(2)缺乏合适的翻译后加工机制,因此表达产物不能适当折叠和修饰;(3)很难在大肠杆菌表达体系中表达大量的可溶性蛋白。
真核表达系统与原核表达系统的共同点 真核与原核细胞结构基因均有调控序列。表达过程都具有复杂性,表现为多环节。表达的时空性,表现为不同发育阶段和不同组织器官上的表达的复杂性。
2、真核原核表达系统的优缺点?
【答案】:原核表达体系如E.coli是当前采用最多的原核表达体系,其优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产工艺。
缺点1,缺乏翻译后修饰加工系统(不能表达糖基化蛋白和结构复杂的蛋白)。2,胞内缺乏高效的表达产物折叠机制(易形成包涵体),分泌机制不完善。3,细胞周质内含有种类繁多的内毒素。
原核表达体系的缺点是:(1) 缺乏合适的转录后加工机制,因此不宜表 达真核生物基因组基因;(2) 缺乏合适的翻译后加工机制,因此表达产物不能适当折叠和修饰;(3) 很难在大肠杆菌表达体系中表达大量的可溶性蛋白。
真核的,优点就是表达出来的蛋白都是可溶的,一般都有活性,各种修饰完备;缺点就是贵,主要是培养基贵。不同的蛋白适合不同的真核表达系统,让有经验的分析下就可以。比如。
3、质粒真核表达载体的特点
真核表达载体在宿主中以质粒形式存在的,可以复制。哺乳动物细胞里没有质粒,外源基因整合到基因组中的,所以不能扩增。由于整合多个位点而产生多拷贝。如果说载体的重组,没区别,都是一样的酶切加连接。细菌转化也一样。
质粒载体的四个基本特征 质粒载体具有独立复制的能力。质粒载体具有选择标记。质粒载体具有独特的酶切位点。质粒载体能够转化但是不扩散。
指代不同 真核过表达质粒:真核细胞表达载体之一为pEGFP-N1载体,具有对方面的优点。pEGFP-N1载体上携带有EGFP蛋白表达基因。原核过表达质粒:能携带插入的外源核酸序列进入原核细胞中进行表达的载体。
简述质粒的特性介绍如下:1,环状DNA分子能够自我复制,或整合到染色体上,随染色体复制.(最重要一点,可复制)。2,有多个限制酶切点(便于切割)。3,有标记基因(便于进行检验)。用途:基因工程中用于重组质粒的构建。
质粒5个特点:质粒具有自我复制的能力。质粒DNA所编码的基因产物赋予细菌某些性状特征。质粒可自行丢失与消除。质粒的转移性。质粒可分为相容性与不相容性。
到此,以上就是小编对于真核表达载体的构建优点的问题就介绍到这了,希望介绍关于真核表达载体的构建优点的3点解答对大家有用。
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