本篇文章给大家谈谈昆虫杆状病毒载体构建图，以及杆状病毒载体的优点对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。 今天给各位分享昆虫杆状病毒载体构建图的知识，其中也会对杆状病毒载体的优点进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！

1. 杆状病毒质粒构建步骤
2. 杆状病毒表达系统的杆状病毒转染载体和AcNPV DNA的发展
3. 杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务案例—钟鼎生物

1、杆状病毒质粒构建步骤

通过PCR扩增目的基因片段 PCR要设计引物，设计引物时要选择合适的同源序列，根据质粒载体和基因序列要选择合适的酶切位点，PCR的产物要纯化。

克隆质粒载体的构建：首先将目的基因的编码序列与质粒载体的复制子序列连接，构建出重组质粒。然后通过转化将重组质粒导入大肠杆菌中，筛选出含有重组质粒的菌落。

此外，在构建质粒过程中，还会加入一些酶，比如胞嘧啶去氧核糖核酸酶等，来有效促进和加强复制过程中质粒，协助把复制后的DNA片段定位与模板DNA上，形成可合成的质粒。

根据你已知的序列设计带有酶切位点的引物。（2）PCR，跑胶，看看你的目的条带大小对不。（3）条带对的话再重新跑个大孔胶，然后切胶回收。

同源重组构建质粒步骤是选择合适的质粒载体、构建同源重组质粒、筛选带有外源DNA序列的质粒。选择合适的质粒载体：首先需要选择合适的质粒载体，考虑到外源基因的大小、表达强度和选择标记等因素。

2、杆状病毒表达系统的杆状病毒转染载体和AcNPV DNA的发展

杆状病毒转染载体大致可分为下面3类； 如有限稀释法[3]、DNA斑点杂交[3]也可用于筛选重组病毒，缺点在于不能精确地筛选出来源于单一重组病毒的毒株。

该种杆状病毒在昆虫细胞核内复制的两个显著方面就是形成BV和PDV。AcNPV的基因表达分为4个阶段[2]：立早期基因表达，早期基因表达，晚期基因表达和极晚期基因表达。

杆状病毒表达系统（Baculovirus Expression System， BVES）发展于20世纪80年代初，是目前常用的真核表达系统之一，常用的杆状病毒有AcMNPV和BmNPV[27-31]。

所以，近年来利用该系统表达寡聚蛋白质的研究尤其引人瞩目。

3、杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务案例—钟鼎生物

常用的杆状病毒包括苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（AcNPV）和家蚕型多角体病毒（BmNPV），常用的宿主细胞则来源于草地夜蛾Sf9细胞，用于表达外源基因的质粒来源于PUC系列，其含有一个多克隆位点和多角体蛋白启动子。

用杆状病毒做载体，可高效表达外源基因，到目前为止已有几百个包括动植物、病毒、细菌、真菌的基因在昆虫细胞或幼虫体内得到高效表达。

杆状病毒的基因组为单一闭合环状双链DNA分子，大小为80～160 kb，其基因组可在昆虫细胞核内复制和转录。

DNA共转染昆虫细胞，通过多角体蛋白基因启动子两端的侧翼同源序列与AcNPV DNA在胞内发生同源重组，使多角体基因被外源基因取代，而将外源基因整合到病毒基因组的相应位置，这样就获得了重组的杆状病毒。

为昆虫杆状病毒表达系统之一。家蚕杆状病毒表达系统具有以下优点：（1）能够对重组蛋白进行转录后加工与修饰，使它们在结构及功能上更接近于天然蛋白，与原核系统相比更能保证蛋白的生物学活性。

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