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1. 构建基因表达载体的目的是什么?
2. 目的基因重组表达载体的构建及在原核中的表达
3. 基因表达载体的构建 关于基因表达载体的构建介绍

1、构建基因表达载体的目的是什么?

基因表达载体 的构建的目的：使 目的基因 在 受体细胞 中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。组成：目的基因 启动子 终止子 标记基因 。

基因表达载体的构建，即目的基因和运载体结合，是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

通过载体把目的基因片段导入活细胞。构建基因表达载体也就是把目的基因和载体连接，使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

尽管构建克隆载体也存在操作复杂（相对于PCR），成功率不是极高，而且还要筛选，但一旦你重组成功并转入了大肠杆菌，你就可以保存了，你想什么时候用，摇个菌，就可以制备到大量的DNA。测序需要。

切割质粒和目的基因的限制酶必须是同-.种酶，以获得相同的黏性末端，利于重组质粒的构建。插入的目的基因只是结构基因部分，其表达需要调控序列，因而用作载体的质粒的插入部位前须有启动子，后须有终止子。

2、目的基因重组表达载体的构建及在原核中的表达

目的基因重组表达载体的构建及在原核中的表达是生物技术领域的重要研究内容。目的基因重组表达载体的构建是将目的基因与适当的调控序列（如启动子、转录终止信号序列等）和标记基因连接在一起，形成重组表达载体。

例如，如果我们想研究代谢途径，可以选择参与该途径的多个关键酶编码基因进行串联重组。 选择载体：在选择载体时，需要考虑载体的类型、大小、复制起始位点、选择标记和启动子等元素。常用的原核表达载体包括质粒和噬菌体。

【结论】 成功构建了人resistin基因原核表达载体，且构建的载体能表达出含目的蛋白的融合蛋白，为下一步研究打下了实验基础。

过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

表达载体不同：原核表达载体构建重组表达载体：载体酶切：将表达质粒用限制性内切酶（同引物的酶切位点）进行双酶切，酶切产物行琼脂糖电泳后，用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

3、基因表达载体的构建 关于基因表达载体的构建介绍

基因表达载体的构建，即目的基因与运载体结合，是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心，其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

启动子、终止子：启动子、终止子是目的基因DNA上特殊排序的碱基。RNA从启动子开始转录、翻译，到终止子结束。整个过程完成后便产生所需蛋白质。如果不清楚RNA的转录翻译过程，可以再细说。

基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。

构建基因表达载体 DNA的分子链被切开后，还得缝接起来以 5年，科学家们在1967完成基因的拼接。 个实验室里几乎同时发现并提取出一 种酶，这种酶可以将两个DNA片段连接起 年以1974来，修复好DNA链的断裂口。

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