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1. 做完一个转基因实验大概需要多久时间?能不能帮忙说说具体设计步骤!_百度...
2. 载体构建摇菌时间
3. 表达载体的构建中目的片段与表达载体的连接最好是几个小时?时间长一点...
4. 构建载体连接时间最短多长

1、做完一个转基因实验大概需要多久时间?能不能帮忙说说具体设计步骤!_百度...

转基因作物的安全性验证过程近乎严苛，如果非转基因食品用同样严苛的手段来进行检测，我相信至少要被淘汰三分之一以上。

通过根癌农杆菌介导等方法将Bt基因转入棉花植株的细胞中后，棉株体内也能合成Bt杀虫蛋白。[1]转Bt基因抗虫棉的杀虫谱因Bt基因不同而存在差异。

昆虫转基因最成功的方法是利用转座原理，即利用转座酶将目的基因插入基因组中。

实验准备、实验中和实验结论。农业转基因生物是指利用基因工程技术改变基因组构成，用于农业生产或者农产品加工的动植物、微生物及其产品。

2、载体构建摇菌时间

摇菌的大摇时间要求一般不是很严格，通常12到16小时，不过可以随时观察，看菌液变混浊了就差不多了。摇菌的小摇时间要求是不低于12个小时即可。

摇菌的时间要求一般不是很严格，通常12至16小时，摇菌还分为大摇和小摇，大摇时间为16个小时，小摇时间为12个小时。摇菌是用来一种培养细菌的方法，有时候是1：1000是不影响菌种活力。

-24小时左右。摇菌是将细菌接种到液体培养基中，然后通过摇晃的方式使细菌在培养基中均匀分布，以促进其生长和繁殖的过程。摇菌的时间因细菌的种类、培养条件和实验目的而异，一般来说，摇菌的时间在12-24小时左右。

连接后要转化进大肠杆菌感受态中。37℃ 200rpm 摇菌一个小时。（6）之后涂布至固体培养基上。

3、表达载体的构建中目的片段与表达载体的连接最好是几个小时?时间长一点...

当拿到一个基因的DNA片段后，就需要把它导入一个载体，一方面长期保存。另一方面也需要以载体为媒介将基因导入受体细胞中。基因表达载体的构建是基因工程的核心。常用的载体有细菌质粒，噬菌体和动植物病毒。其中质粒载体最常用。

目的基因重组表达载体的构建是将目的基因与适当的调控序列（如启动子、转录终止信号序列等）和标记基因连接在一起，形成重组表达载体。这个过程通常需要使用限制性核酸内切酶和连接酶等工具酶，以确保重组载体的正确性和稳定性。

合理设计启动子和终止子：在表达载体中加入合适的启动子和终止子可以调控目的基因的表达水平。启动子应该是特异性的，可以确保外源基因在宿主细胞中的表达。终止子可以保证转录的准确终止，防止意外的后效应。

目的基因前面必须有启动子啊。而启动子是和你的载体转入的宿主对应的。比如，你要转载体到大肠杆菌里面，目的基因前面得有原核启动子，效率越高越好。而，启动子和基因的距离会影响表达效率。

4、构建载体连接时间最短多长

分钟可完成连接反应。在进行DNA重组时，将目的基因连接到零背景载体上所需的时间。由于零背景载体本身是一种高效的限制性内切酶位点缺失的载体，可以避免背景杂交的问题，因此在30分钟可完成连接反应。

在20 μl的连接反应体系中，6 μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。

小时。平末端（bluntend）的连接5’端与3’端并列靠近的时间太短，不容易被连接酶连接。T4DNA连接酶虽然能连接平末端，但效率很低只有粘性末端的效率很低，通常连载时间为小时。

目的片段和载体的质量最好高一些。2）按照常规连接体系进行，一般20ul体系。3）连接温度20-25度。由于平端连接不涉及粘性末端的互补，所以温度可以高一些。4）酶的用量不要过量，按照说明就可以。

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