本篇文章给大家谈谈表达载体构建后跑胶长度，以及表达载体图谱对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。 今天给各位分享表达载体构建后跑胶长度的知识，其中也会对表达载体图谱进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！

1. dna跑胶浓度和片段大小
2. 连接转化长一满板是怎么回事啊
3. 跑胶浓度和片段大小

1、dna跑胶浓度和片段大小

琼脂浓度根据DNA片段大小来决定，片段大，浓度低，1000bp浓度约为5%。片段小，浓度高，200bp浓度约为2-3%。放入凝胶槽中。根据需要，选择不同大小的插板，插板有大有小。批量大的实验可用大插板。

凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA段所需胶浓度是2-5%，分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%， DNA段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-0%。

跑胶浓度和片段大小：片段越长跑的越慢，因此不同长度的链就被分开了。琼脂糖以及TAE的量的多少，首先与跑得样品的个数有关，因为样品的个数决定了胶槽的体积，胶槽的体积决定了你的TAE的量，决定了琼脂糖的量。

DNA片段越小，胶的浓度需要大些，原因就是胶的浓度越低，形成的孔径就越小，小片段DNA比大片段DNA跑得快。反之，DNA片段越大，胶浓度越小，形成的孔径就越大，大片段DNA比小片段DNA跑得快。

2、连接转化长一满板是怎么回事啊

应该是设置无线路由器的连接数量，达到上限就不能上网了。

能长出克隆是很正常的，因为理论上酶切1小时是足够的，但是很有可能还有没有被切动的。另外，Amp容易降解，配制好的Amp板子放久了，或者培养时间过长，都有可能因为Amp降解，造成会有菌落长出来的。

转化效率低。酶切连接转化后平板不长是因为转化效率低。

第一次将目的基因连接E1 转化T1感受态细胞后涂平板，平板长满了菌落，但是挑菌发现并非阳性克隆（快挑了100个了 T-T 也是要哭了）。第二次又做了一次连接转化，涂平板后彻底不长菌了。

我平时做转化的时候都是用的100ul的感受态，200ul产物，先冰浴吸附半小时，然后热激90S，加复苏液600-800UL，37°摇床60分钟，最后涂板。每次长的都挺好的，你试试。

3、跑胶浓度和片段大小

跑胶浓度和片段大小：片段越长跑的越慢，因此不同长度的链就被分开了。琼脂糖以及TAE的量的多少，首先与跑得样品的个数有关，因为样品的个数决定了胶槽的体积，胶槽的体积决定了你的TAE的量，决定了琼脂糖的量。

跑胶时间除了与琼脂糖浓度有关，还与DNA片段大小有关。DNA片段越小，胶的浓度需要大些，原因就是胶的浓度越低，形成的孔径就越小，小片段DNA比大片段DNA跑得快。

浓度通常在0.5~2%之间。跑胶图需要样品浓度通常在0.5~2%之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析，但是低浓度胶易碎。

越长的片段越应该用软一些的胶，越短的用越硬的，软硬是形容浓度，也就是交联度的 。

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