大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于如何构建不降解的载体系统的问题，于是小编就整理了3个相关介绍如何构建不降解的载体系统的解答，让我们一起看看吧。

1. 如何进行植物基因工程中的载体构建
2. 如何构建载体
3. 将外源基因导入原核细胞或真核细胞分别有哪些方法?

1、如何进行植物基因工程中的载体构建

①用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制（称为克隆）。理想的运载体是质粒（plasmid），在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。

载体构建：将目的基因通过酶连接到一个特定质粒分子上，构成一个插入目的片段的新的质粒分子。 遗传转化：最简单的花序浸染，常用的农杆菌转化、基因枪轰击，还有花粉管通道等。

载体构建的方法：将外源DNA片段与线性化的质粒进行连接，形成重组质粒。使用适当的转化方法将构建好的质粒转化到目标细胞中，使其能够进入细胞内。

在植物基因工程研究中，这些人工组建的启动子发挥了重要作用。

2、如何构建载体

②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制（称为克隆）。理想的运载体是质粒（plasmid），在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。

选择合适的载体：根据实验目的和需要，选择适合的载体。常用的载体有质粒、噬菌体、病毒等。 设计引物：根据目标基因的序列，设计合适的引物。引物的设计需要考虑其特异性、长度、GC含量等因素。

首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。

载体构建的方法：将外源DNA片段与线性化的质粒进行连接，形成重组质粒。使用适当的转化方法将构建好的质粒转化到目标细胞中，使其能够进入细胞内。

3、将外源基因导入原核细胞或真核细胞分别有哪些方法?

【答案】：（1）将重组质粒导入原核细胞称转化，通常用氯化钙法使大肠杆菌细胞处于感受态，从而将外源DNA导入细胞。另一个常用方法是用脉冲高压电瞬间处理，使外源DNA高效导入细胞，称为电穿孔法。

传导：利用噬菌体（细菌感染病毒）作为载体，将外源DNA引入到原核细胞中。接合：通过细菌之间的直接接触，将某一细菌中的DNA传递给另一细菌，从而使外源DNA被接受并与细菌染色体发生重组。

主要方法：【1】导入植物受体细胞：（1）农杆菌转化法。

意思不同 （1）转化：含外源基因的重组质粒（载体）将外源基因直接导入原核细胞（如细菌）。（2）感染：在基因转移实验中强调重组病毒载体入侵受体细胞的过程。

物理方法 DNA直接注射法、颗粒轰击技术。2 化学方法 脂质体载体、受体介导法。3 生物学方法 主要通过构建病毒载体来完成。如逆转录病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒、腺相关病毒、痘苗病毒、杆状病毒。

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