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1. RNAi技术可用于细菌基因的研究吗
2. λDNA载体不适合表达外源基因的原因
3. 简述RNAi技术在分子生物学领域的应用前景和存在的问题。
4. 什么是基因干扰,列举基因干扰的主要方法以及原理
5. RNAi技术在分子生物学领域的应用前景和存在的问题

1、RNAi技术可用于细菌基因的研究吗

RNAi技术是一种利用RNA干扰的技术，可以用来研究基因的功能。要利用RNAi技术研究基因的功能，首先要构建RNA载体。

RNAi技术具有高效性和高度特异性 ，作为关闭基因的新技术 ，已成为基因功能研究中的一种快速、简便的方法 。由于可以作为代替基因敲除的基因工具 ，RNAi技术正在改变着功能基因组学领域的研究步伐 。

RNAi技术在基因功能的研究上有其独特的优点 ： 简单易行，容易操作。对于动物来说，只要饲喂或注射即可，对植物可采用金属插入或农杆菌介导法。RNAi技术在转染细胞后48小时即可抑制基因的表达。

可以高通量地发现药物靶基因，帮助新药物的研究和开发，了解药物作用的生化模式等；（4）用于基因治疗；（5）RNAi还可用于细胞周期调控、代谢、膜转运以及DNA损伤反应、转录或甲基化等多种方面的基因功能研究。

因此，RNAi技术的诸多优点使它很快便被作为研究基因功能的主要方法。

2、λDNA载体不适合表达外源基因的原因

但不适合表达外源基因。（3）λ噬菌体载体的主要应用：λ噬菌体载体属于克隆载体，主要用于克隆DNA片段、构建cDNA文库和基因组文库，并从中筛选目标基因，也可用在大容量载体（如黏粒）中增殖的外源DNA片段和亚克隆。

DNA甲基化引起外源基因失活是不稳定的，去甲基化试剂可恢复外源基因的表达活性，有性杂交、体外培养、嫁接、生存环境的改变都可使外源基因甲基化发生变化。

因为基因的插入和切断是有特殊位点的不是随意的插入和切断，而且别把DNA想得太短，很长的，没有表达意义的序列非常多，真核生物基因转录下的MRNA ，也有无用序列需要剪切组合才可用。

①组建融合基因，产生融合蛋白。融合蛋白的载体部分通过构象的改变，使外源蛋白不被选择性降解。这种通过产生融合蛋白表达外源基因，特别是相对分子 质量较小的多肽或蛋白编码的基因，尤为合适。②产生可分泌的蛋白。

通过这种方式，就将外源DNA片段通过黏粒载体克隆到大肠杆菌中了。与λ噬菌体载体不同的是，外源片段克隆在黏粒载体中是以大肠杆菌菌落的形式表现出来的，而不是噬菌斑，这样所得到的菌落的总和就构成了基因文库。

3、简述RNAi技术在分子生物学领域的应用前景和存在的问题。

RNAi机制可作为真核生物的基因免疫系统，抑制外源和内源有害基因的表达。利用RNAi技术把与病毒基因具有同源的siRNA感染细胞将会抑制病毒的增殖，这能有效的治疗与病毒相关的疾病。

虽然对RNAi的研究只有短短几年时间，但RNAi技术已经快速被应用于多个领域，目前在植物上主要用于基因功能研究。

rnai指RNA干扰 RNA干扰（RNA interference， RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。

近几年已经清楚的是，PTGS在植物和动物中都存在，并且在病毒防御和转座子沉默机制中起作用。 然而，也许最令人兴奋的是PTGS的新兴应用，尤其是RNA干扰（RNAi）——通过引入双链RNA（dsRNA）引发的PTGS-作为敲除多种特定基因表达的工具生物。

4、什么是基因干扰,列举基因干扰的主要方法以及原理

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。

RNA干扰（RNA interference， RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。

与RNAi有关的dsRNA及蛋白质可参与染色质的修饰作用，使其中的组蛋白和DNA发生甲基化作用，使相应基因不能被转录，从而导致受阻基因不能表达。

RNA干扰是vigs基因沉默的重要机制。RNA干扰，简称RNAi，是一种自然的基因沉默机制，通过小分子RNA分子介导的切割过程来特异性地降低目标基因的表达。在vigs基因沉默中，RNA干扰起着重要的作用。

5、RNAi技术在分子生物学领域的应用前景和存在的问题

RNAi机制可作为真核生物的基因免疫系统，抑制外源和内源有害基因的表达。利用RNAi技术把与病毒基因具有同源的siRNA感染细胞将会抑制病毒的增殖，这能有效的治疗与病毒相关的疾病。

虽然对RNAi的研究只有短短几年时间，但RNAi技术已经快速被应用于多个领域，目前在植物上主要用于基因功能研究。

环境保护和生物工程 分子生物学在环境保护和生物工程领域也有广泛的应用前景。通过分子生物学技术，可以开发新型的生物降解材料，用于环境污染物的处理和清除。

RNA干扰（RNA interference， RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。

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