大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于质粒载体的构建在体外还是体内的问题，于是小编就整理了3个相关介绍质粒载体的构建在体外还是体内的解答，让我们一起看看吧。

1. 基因工程中为什么要将质粒放入受体细胞内,在体外复制不行吗
2. 重组质粒的形成在哪里完成?
3. 目的基因与质粒结合发生在哪里?

1、基因工程中为什么要将质粒放入受体细胞内,在体外复制不行吗

可能会表达，单只要目的基因能表达就不会影响的。重组DNA，大部分都是以质粒为载体，是在受体细胞的细胞质中。如果是以病毒为载体，可能会整合到受体细胞的细胞核染色体DNA中。

质粒在基因工程中是作为载体送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。质粒具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息。细菌质粒是DNA重组技术中常用的载体。

质粒是原核生物细胞内的一些小型环状DNA，它能够在活细胞能进行自主复制（不受核基因影响），并且质粒中含有很多基因插入位点和一些抗性基因。

四个条件：质粒是环状DNA分子（cDNA），可以游离于细胞质中，并稳定的存在。质粒的复制不受细胞核基因的干扰，自主的复制。质粒上面有多个限制性内切酶位点，可以携带多种DNA片段。

2、重组质粒的形成在哪里完成?

首先，质粒是从大肠杆菌里提取的。质粒是最常用的运载体。而受体细胞之中没有质粒，当然就要先从大肠杆菌里提取出质粒，在体外构建表达载体，然后导入受体细胞。其次，要对质粒进行切割。

[解析] 提示：限制酶除获得目的基因时用外，还能把运载体切开；重组质粒的形成是在细胞外完成的；不是所有的质粒都可以作运载体，运载体必须具备以下三个条件：①能在宿主细胞中复制并稳定地保存；②具有多个限制酶切点；③具有标记基因。

构建重组质粒所须目的基因可在基因文库中获取，或化学方法人工合成。须通过PCR扩增，再用相同的限制性核酸内切酶对目的基因和质粒近行修饰。然后再用DNA连接酶进行连接。

此后，要把基因表达载体也就是重组质粒导入受体细胞，再对目的基因进行选择（质粒上有标记基因），然后让重组质粒复制和表达，（在这里重组质粒是随受体细胞共同复制的），这些是在细胞内进行的。

3、目的基因与质粒结合发生在哪里?

目的基因一般是插入质粒的多克隆位点，这里含有多种人工构建的限制酶酶切位点，方便进行克隆。

连接到质粒：接下来，使用限制性内切酶等酶切工具，在质粒DNA和目的基因的末端引入互补的限制性内切位点。

是两个质粒的重组，因为是同一种限制酶切割的，两个质粒可以重组。而且既然是质粒与质粒，就是指两个质粒间的重组。

目的基因跟质粒靠黏性末端结合在一起，目的基因的碱基和质粒的碱基通过碱基互补配对组合，A与T与对，C与G配对。

质粒是一种DNA分子，它们在生物学上被用来存储和转移遗传信息。在基因工程中，质粒通常用作载体，用于将目的基因植入另一个细胞中。通过将目的基因克隆到质粒中，并将质粒植入另一个细胞中，可以实现目的基因的连接。

到此，以上就是小编对于质粒载体的构建在体外还是体内的问题就介绍到这了，希望介绍关于质粒载体的构建在体外还是体内的3点解答对大家有用。