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1. 什么是拟南芥,拟南芥的作用有哪些?
2. 拟南芥转化技巧
3. 植物抗旱性与拟南芥转基因之间的关系及具体步骤
4. 拟南芥激活标签实验

1、什么是拟南芥,拟南芥的作用有哪些?

本文以Columbia野生型拟南芥为材料，用酶解法对拟南芥叶肉进行原生质体分离，用PEG介导的转化法将外源基因转化到原生质体中进行瞬时表达。

拟南芥的别称为鼠耳芥，属于被子植物中的一年生细弱草本，株高通常在二十到三十五厘米的范围内，花期为每年的四到六月份，养殖拟南芥时，要将其播种到腐殖土和珍珠岩混合调配后的土壤中，再将播种好的植株，放置在温室内养护。

拟南芥别称为鼠耳芥、阿拉伯芥以及阿拉伯草，属被子植物门，双子叶植物纲，十字花科植物，植株是一种一年生的细弱草本。它的胚珠外面有子房壁包被，种子外有果皮包被形成果实。

拟南芥是自花受粉植物，基因高度纯合，用理化因素处理突变率很高，容易获得各种代谢功能的缺陷型。拟南芥在我国湖北、四川、云南等省区均有野生种发现。

2、拟南芥转化技巧

这个过程本身很简单。当你的农业细菌培养做好准备后，将它们向下旋转，并将它们重新悬挂在转化介质中。如果你在浸泡你的植物，把培养放进一个足够宽的容器里，把你的植物的花浸在里面。

日常使用浸花法（floral dip method）（Clough等，1998）转化拟南芥。

在箱底撒水保湿，然后将花盆平放到箱子中，并用塑料袋罩住箱子暗培养16-24h（过夜）后，将拟南芥放置于塑料培养池内，并浇足horgland营养液，恢复正常培养。

在拟南芥蘸花转化前，需要将盛开的花朵和角果剪掉，这是因为这些部分可能已经错过了转化的最佳时期，而且可能会影响实验的准确性。具体来说，当拟南芥的花朵盛开时，其生殖细胞已经形成并且开始成熟。

选择内质网膜内嵌蛋白SIP及肌动蛋白相关蛋白ARP6进行研究。通过RT-PCR扩增得到SIP（720bp）基因及ARP6（1200bp）基因，再将它们分别构建到瞬时表达载体pA7-YFP上，用PEG法将其转化入拟南芥叶肉原生质体进行表达。

3、植物抗旱性与拟南芥转基因之间的关系及具体步骤

根系。植物根系是植物直接吸收水分的重要器官，它对植物的耐旱功能具有至关重要的作用。纵深发达的根系系统可使植物充分吸收利用贮存在土壤中的水分，使植物度过干旱期。一般认为抗旱性强的植物，根水势低，利于水分吸收。

SOD是植物体内第一个清除活性氧的关键抗氧化酶，近年来，通过SOD基因工程改良植物耐旱性。如将烟草的Mn-SODcDNA导入苜蓿后，转基因苜蓿的抗旱性得到了提高，保持较高的生活力。

转基因对拟南芥的表达途径如下。农杆菌介导的转化。农杆菌侵染，目的基因所在质粒和穿梭质粒共转农杆菌，在拟南芥抽薹前侵染。

学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理。

敲除、屏蔽等方法改变生物体的遗传特性，获得人们希望得到的性状。这一技术的主要过程包括外源基因的克隆、表达载体构建、遗传转化体系的建立、遗传转化体的筛选、遗传稳定性分析和回交转育等。

4、拟南芥激活标签实验

首先，以哥伦比亚野生型拟南芥为实验材料，用含有激活标记双元质粒pCB260的农杆菌浸花进行转化，构建拟南芥T-DNA插入突变体库。其次，进行突变体的筛选和表型分析。

激活标签即在农杆菌T-DNA序列前有四个串联的增强子。

回到波恩大学的实验室后，Laibach将这株植物的细胞染色并在显微镜下观察，发现细胞中只有5条染色体，这是一项令人兴奋的发现，因为当时科学界所熟知的染色体数为奇数时的最小数目即为5条。

研究表明，逆转座子在很大程度上是侵略性的，通常情况下逆转座子被严格控制，但在胁迫条件下，逆转座子可被激活。

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