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敲除载体构建目的,载体构建和选择的条件

敲除载体构建目的,载体构建和选择的条件

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  1. 基因敲除是怎么回事?
  2. 基因敲除技术(gene knockout)
  3. 基因功能与敲除载体构建的关系?

1、基因敲除是怎么回事?

将细胞基因组中某基因去除或使基因失去活性的技术。去除原核生物细胞、真核生物的生殖细胞、体细胞或干细胞基因组中的基因等。

是指在基因序列里插入两个flox位点,当与cre小鼠杂交后激活flox位点从而敲掉两个flox之间的那一段基因。

简单的说,就是把特定的一个基因从基因组中去掉(knock out),然后看看有什么反应。如果出现了异常,说明敲掉的这个基因有相关的功能。敲掉的方法现在比较多,一般是通过同源重组,也有用RNA干扰之类。

因为基因家族的其他成员可以提供同样的功能;另一方面,对于某些必需基因,敲除后会造成细胞的致死性,也就无法对这些必需基因进行相应的研究了。天性遗传病经过基因敲除后到下一代还会不会遗传,这个不确定。

基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。它克服了随机整合的盲目性和偶然性,是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。

2、基因敲除技术(gene knockout)

简称KO,是一种生物体的其中部分基因不起作用的技术。也叫做敲除生物体或者仅仅劣汰。它们用于学习已知序列,不知功能的基因,调查基因缺失的影响。研究人员对敲除生物体和正常生物的不同得出结论。方法 基因敲除融合各种技术。

基因敲除技术,即是可以针对一个 DNA 碱基序列已知但功能未知的基因,通过抑制该基因的表达,分析突变体表型变化后来确定该基因的功能。

基因敲除(knockout)是指通过一定的技术方法使机体特定的基因失活或者缺失的技术。针对某个序列已知但功能未知的序列,改变生物的遗传基因,令特定的基因功能丧失作用,从而使部分功能被屏蔽,并可进一步对生物体造成影响。

是指在基因序列里插入两个flox位点,当与cre小鼠杂交后激活flox位点从而敲掉两个flox之间的那一段基因。

3、基因功能与敲除载体构建的关系?

基因敲除技术,即是可以针对一个 DNA 碱基序列已知但功能未知的基因,通过抑制该基因的表达,分析突变体表型变化后来确定该基因的功能。

基因敲除指利用染色体间基因打靶的原理,通过将设计好的打靶载体导入细胞后,同源臂发生同源重组,从而在基因组的某个特定位点引入预定的突变,获得基因型发生了改变的动物。

是指在基因序列里插入两个flox位点,当与cre小鼠杂交后激活flox位点从而敲掉两个flox之间的那一段基因。

利用同源重组构建基因敲除动物模型的基本步骤:a.基因载体的构建:把目的基因和与细胞内靶基因特异片段同源的DNA分子都重组到带有标记基因(如neo基因,TK基因等的载体上,成为重组载体。

基因表达载体的构建,即目的基因与运载体结合,是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心;其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。

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