大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于构建rnai的载体的问题，于是小编就整理了3个相关介绍构建rnai的载体的解答，让我们一起看看吧。

1. 构建RNAi载体用的I型启动子和其他启动子有什么区别?用II型不行么...
2. ...利用RNAi技术研究该基因的功能?RNAi载体怎么构建?
3. 如何构建RNA干扰载体?

1、构建RNAi载体用的I型启动子和其他启动子有什么区别?用II型不行么...

它不必有强启动子，因为不重于表达。表达载体是基因克隆结束后，为了在特定细胞内表达而构建的。他重点在于表达，有各种各样的启动子适应于不同种类的细胞，并且有各种各样，如诱导等可控的表达调控方式。

肝细胞中表达的高活性启动子使小鼠过表达OPG （osteoprotegerin） 基因，得到的转基因小鼠的骨密度 明显高于正常小鼠，说明该基因参与骨质合成[4 ] 。

第一种可以直接或经由其他中介蛋白质的作用，而与负责转录的RNA聚合酶结合，再使聚合酶与启动子结合，并开启转录作用。第二种则与专门修饰组织蛋白的酵素结合于启动子上，使脱氧核糖核酸模板与聚合酶发生接触的难度改变。

在RNA复制酶作用下，按5；→3；方向合成互补的RNA分子。但RNA复制酶中缺乏校正功能，因此RNA复制时错误率很高，这与反转录酶的特点相似。RNA复制酶只对病毒本身的RNA起作用，而不会作用于宿主细胞中的RNA分子。

2、...利用RNAi技术研究该基因的功能?RNAi载体怎么构建?

“酶切-连接”方法是通常构建RNA干扰载体最常用的方法，被广泛应用于各种生物之中。其构建过程是：通过PCR方法得到目的基因的片段（添加了合适的酶切位点），使之正反相连形成顺式片段和反式片段。

RNAi是一种高效的特异性强的基因阻断技术。可以快速分析靶基因的功能，RNAi发展迅速，已成为功能基因组研究和反向遗传学研究的有力工具。RNAi技术被《Science》杂志评为2002年度的十大科技突破。

rnai技术的基本程序主要为：确定干扰靶点、合成siRNA、转染siRNA到细胞中。确定干扰靶点：通过基因组学凳厅袜、转录组学等手段，确定需要干扰的靶基因或RNA。

RNAi是有dsRNA参与指导的，以外源和内源mRNA为降解目标的转基因沉默现象。具有核苷酸序列特异性的自我防御机制，是一种当外源基因导入或病毒入侵后，细胞中与转基因或入侵病毒RNA同源的基因发生共同基因沉默的现象。

3、如何构建RNA干扰载体?

“酶切-连接”方法是通常构建RNA干扰载体最常用的方法，被广泛应用于各种生物之中。其构建过程是：通过PCR方法得到目的基因的片段（添加了合适的酶切位点），使之正反相连形成顺式片段和反式片段。

用RNase Ⅲ 消化长片断双链RNA制备siRNA其他制备siRNA的方法的缺陷是需要设计和检验多个siRNA序列以便找到一个有效的siRNA。而用这种方法——制备一份混合有各种siRNAs “混合鸡尾酒” 就可以避免这个缺陷。

siRNA表达载体构建好后，即可进行RNA干扰主体实验。

在线虫细胞膜上发现一种跨膜蛋白SID1，可以将双链RNA转运出细胞。因此系统性的RNAi包括了SID1介导的双链 RNA在细胞间的运输。但在果蝇上并未发现有此基因的同源物，因此在果蝇上通过注射产生的RNAi不能扩散。

到此，以上就是小编对于构建rnai的载体的问题就介绍到这了，希望介绍关于构建rnai的载体的3点解答对大家有用。