载体构建反应原理图,载体构建的原理
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1、酵母人工染色体的YAC 载体的工作原理
人工染色体载体(artificial chromosome vector):利用染色体的复制元件来驱动外源DNA片段复制的载体。
随后与两端具emphasis:role=italicEcoemphasisRI酶切末端的外源DNA连接,构成酵母人工染色体。用电激仪把此人工染色体转化人酵母受体细胞。
.YAC人工染色体载体的复制元件和标记基因在 YAC 载体中最常用的是 pYAC4 。由于酵母的染色体是线状的,因此其在工作状态也是线状的。
人工染色体是人工构建的一类能携带大片段DNA的克隆载体。酵母人工染色体(YAC)是一类目前能携带最大外源DNA片段的人工构建载体。含有着丝粒、端粒、酵母自主复制序列3个酵母染色体必要元件,还含有限制性内切酶位点和选择标记基因。
有些克隆不稳定。(3)YAC克隆不容易与酵母自身染色体相分离。应用领域在染色体区带构建YAC重叠群,可以促进大规模基因组测序和致病基因的克隆。 细菌人工染色体(BAC)是以细菌F因子为基础构建的细菌克隆载体。
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