大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于引物构建载体的设计的问题，于是小编就整理了1个相关介绍引物构建载体的设计的解答，让我们一起看看吧。

1. 构建载体时怎么设计引物

1、构建载体时怎么设计引物

如果t载体上没有表达载体上需要的酶切位点，就要重新设计带酶切位点的引物，pcr扩增t载体后酶切并连表达载体。如果t载体上有需要的酶切位点，直接酶切后回收目的片段，连接表达载体即可。

第一次PCR：F R1 cDNA→A，F1 R cDNA→B；因为F和R端是全长的两端。因此需要设计出所需要的酶切位点 ，这个可以根据自己的载体来确定。

引物5’端可以修饰。引物5’端序列对PCR影响不太大，因此常用来引进修饰位点或标记物。验证引物的特异性：在“Primer Pair Specificity Checking Parameters”区，选择设计引物或验证引物时的目标数据库和物种。

植物转基因载体和这些酶都是非常常用的试剂。载体构建好之后需要把它们导入大肠杆菌中复制，这里就要用到大肠杆菌的感受态了，十把构建好的载体和感受态混合，然后放到42度热水处理个1分钟，再冰上放个3分钟。

如果t载体上没有表达载体上需要的酶切位点，就要重新设计带酶切位点的引物，PCR扩增t载体后酶切并连表达载体。如果t载体上有需要的酶切位点，直接酶切后回收目的片段，连接表达载体即可。

关于引物构建载体的设计和引物设计的详细步骤的介绍到此就结束了，不知道你从中找到你需要的信息了吗 ？如果你还想了解更多这方面的信息，记得收藏关注本站。 引物构建载体的设计的介绍就聊到这里吧，感谢你花时间阅读本站内容，更多关于引物设计的详细步骤、引物构建载体的设计的信息别忘了在本站进行查找喔。