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1. M13噬菌体的构建

1、M13噬菌体的构建

【答案】：M13噬菌体载体是基于大肠杆菌M13丝状噬菌体基因组构建的载体，在M13噬菌体基因组基因间隔区中插入β-半乳糖苷酶N端一小段编码序列（内插入若干限制性内切酶的单一切点）及其调控序列。

DNA片段制备：将目标基因片段进行PCR扩增，引入所需的限制酶切位点。根据需要，选择合适的载体进行克隆。常用的载体包括噬菌体M1pComb3X等。构建噬菌体文库：将目标基因片段与载体进行连接，产生融合蛋白编码DNA。

M13 噬菌体的基因组为单链 DNA （ DNA），由 6407 的碱基组成。基因组 90% 以上的序列可编码蛋白质，共有 11 个编码基因，基因之间的间隔区多为几个碱基。

M13丝状单链噬菌体克隆载体是一种常用于分子克隆和DNA测序等实验中的工具，其应用步骤通常包括以下几个方面：插入DNA序列：首先需要将待克隆的DNA片段插入到M13载体的多克隆位点（Multiple Cloning Site， MCS）中。

但M13噬菌体DNA可以转传导进入雌性大肠埃希菌。M13子代噬菌体通过细胞壁挤出，并不杀死细菌，但细菌生长速度缓慢。该类噬菌体作为克隆载体，可以通过质粒提取技术在细菌培养物中获取。M13噬菌体主要用于克隆单链DNA。

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