本篇文章给大家谈谈载体构建目的片段不正确，以及载体构建需要考虑哪些内容对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。 今天给各位分享载体构建目的片段不正确的知识，其中也会对载体构建需要考虑哪些内容进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！

1. 在做克隆时,载体与目的片段的比例怎样确定?比例不对,是造成假阳性的主要...

1、在做克隆时,载体与目的片段的比例怎样确定?比例不对,是造成假阳性的主要...

载体与插入片段比例一般是1：10，通过测定DNA浓度来调整。单酶切片段插入时，载体一定要去磷酸化，载体易自连；双酶切二者比例要适当，比例不对，载体也会自连，因为微生物有自己的修护系统。

第一， TA克隆的自身环化是造成这种现象的最主要原因，根据我的经验，不同公司提供的TA载体的自身环化率在20%到50%之间。这个比例可以通过优化连接反应的条件进行改善。

我觉得，片段与载体比例不是根本原因，300bp很好连，而且是T载体，就算比例比较夸张，对你这样的老手也不会转不出阳性。如果你的片段有酶切位点，直接酶切连目标载体试试。

这就是假阳性。还有一种假阳性，就是目的基因和质粒在连接时，方向接反了。如何防止假阳性，方法有三种。

比例的话尽量保持在10：1~3：1间，太少会降低连接效率，拿不到克隆，太高浪费，也会造成非预料的连接结果。明白了么？问题三：怎样删除镜像文件 10分 可以进到dos状态下删。也可以调出资源管理器。结束无关进程后再删。

到此，以上就是小编对于载体构建目的片段不正确的问题就介绍到这了，希望介绍关于载体构建目的片段不正确的1点解答对大家有用。