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载体构建连接结果,载体构建一直不成功

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  1. 4、构建重组DNA分子时,目的基因与载体连接可能出现几种结果?为什么?

1、4、构建重组DNA分子时,目的基因与载体连接可能出现几种结果?为什么?

单酶切平端, 粘端: 可能有目的基因自连,载体自连,目的基因与载体连接。双酶切平端:可能有目的基因自连,载体自连,目的基因与载体连接。 双酶切粘端: 理论上只可能是目的基因与载体连接。

重组DNA分子的过程中,大量载体和目的基因在一起,可能会产生三种重组分子,包括载体与载体,载体与目的基因,目的基因与目的基因的三种重组DNA分子。

要构建重组载体的目的就是把目的基因连到载体上,所以最有效的重组DNA是目的基因-载体。目的基因-目的基因和载体-载体都是失败的结果,这种结果的产生相对导致基因-载体的结果产生率下降。

如果只能是目的基因和载体连接到一起,那么最后产生的就是目的基因和载体这唯一的一种情况;但现在的情况是,没有要求他们怎样重组,所以他们自身和自身之间也可能形成新的重组DNA,只不过他们不起作用而已。

构建过程中需要限制核酸内切酶、DNA连接酶和运载体三种工具。只考虑两两结合的话,产生3种重组DNA分子,即目的基因和目的基因、运载体和运载体、目的基因和运载体结合形成的重组DNA分子。

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