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1. 如何将两个基因构建到同一个载体上

1、如何将两个基因构建到同一个载体上

还可以用SOE-PCR法将两基因连到一起，但你要考虑载体启动子的问题，可能由于融合基因构象或启动子能力的问题无法正确表达。你可以设计双启动子。

既然要分别表达，则这两个基因应该有完整的表达元件，即：各自的启动子、终止子和翻译起始与终止元件。具有上述完整元件的基因连接在一起即可。

gateway载体一般都是含有两个交换位点attL1和attL2，这两个位点和入门载体上的attR1和attR2的交换位点分别进行重组，从而将目的基因插入到表达载体中。从这个角度来看，很难有可以插入两个基因的gateway载体。

http：//wenku.baidu.com/view/4f0d814afe4733687e21aa1d.html 当然，你把2个序列同时克隆到一个质粒也可以。可以用2个启动子分别驱动，或者串在一起，中间用核糖体结合序列相连，这样翻译的时候可以保证2者都得到翻译。

设计引物把A基因用PCR扩增出来，同时在扩增片段上加上质粒2所带有的两个内切酶位点（例如内切酶X和Z的位点），然后用内切酶X和Z处理质粒2，最后再用连接酶连接带X、Z酶切位点的A片段和内切酶处理后的质粒2，这样就OK了。

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