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1. 反义表达载体如何构建

1、反义表达载体如何构建

将获得的致病基因反向插入表达载体，即可构建成反义表达载体。当反义表达载体导入靶细胞后，就可转录出与致病基因mRNA互补的反义RNA，特异性地封闭致病基因的表达。

载体构建目的 ①用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制（称为克隆）。理想的运载体是质粒（plasmid），在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。

切割质粒和目的基因的限制酶必须是同-.种酶，以获得相同的黏性末端，利于重组质粒的构建。插入的目的基因只是结构基因部分，其表达需要调控序列，因而用作载体的质粒的插入部位前须有启动子，后须有终止子。

用DNA当然不可以了，因为DNA中可能还有内含子，若构建载体会出现错误表达，而cDNA是由RNA反转而来的，一般不会有内含子，就算有也是可变剪接造成的。

以THMADS1的全长序列构建成正义表达载体，用不含MADS-box的区段构建成反义表达载体，将构建的载体转入农杆菌LBA4404中，对拟南芥和烟草进行了转基因的研究，以分析THMADS1的功能。 宣传保护，并进行繁殖试验和少量的移栽。

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