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构建克隆载体的基本原则6,构建克隆载体的目的

构建克隆载体的基本原则6,构建克隆载体的目的

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  1. 克隆载体的必要条件是那些?

1、克隆载体的必要条件是那些?

条件:①能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力。②容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好。③容易插入外来核酸片段,插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。

条件:能在受主细胞内稳定存在,不会对宿主细胞造成危害,能自我复制。具有标记基因。含有1至多个限制酶的识别序列及切点。含有启动子,终止子。

作为基因克隆载体一般应该具备以下条件:(1)在克隆载体合适的位置必须含有允许外源DNA片段插入的克隆位点,并且这样的克隆位点应尽可能的多。作为克隆位点的限制性内切核酸酶的识别序列一般在克隆载体上只有一个。

条件应该是,与细胞质细胞核要有高度的关联融合性,否则细胞排斥会导致基因移植失败;性质在于,质粒拥有DNA,可以方便将目标基因导入质粒DNA,同时又可以在靶细胞得到表达。

克隆载体应具备以下基本特征:自我复制能力、具有筛选标志基因和多个限制性核酸内切酶的单一位点等。表达载体除具有以上特征外,还应具有启动子等转录调控序列、适当的翻译控制序列、合理设计的多克隆位点等。

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