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构建载体摩尔比-载体片段摩尔比计算

构建载体摩尔比-载体片段摩尔比计算

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  1. 构载体连接公式

1、构载体连接公式

λ噬菌体克隆载体:λ噬菌体由DNA(λDNA)和外壳蛋白组成,对大肠杆菌具有很高的感染能力。λDNA在噬菌体中以线状双链DNA分子存在,全长48502bp。

构建叶绿体表达载体时,一般都在外源基因表达盒的两侧各连接一段叶绿体的 D N A 序列,称为同源重组片段或定位片段( T a r g e t i n g f r a g m e n t )。

分钟载体构建(vectorconstruction),为把DNA分子运送到受体细胞中去,必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。

问题二:连接时载体和片段的摩尔比多少合适 跑胶估计就是用你的样品,和DNA marker中已知量的条带的亮度比例,来估算你的样品的DNA样品。这个需要一定的经验。

无缝克隆又叫同源重组,它可以将单个至多个片段同时插入到一个载体中,而不需要进行多次的酶切和纯化。通常情况下,无缝克隆可以在 515 min内完成多个片段的连接,其克隆阳性率高达 98% 以上。

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