载体构建菌落分析图解-菌的载体
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1、植物表达载体构建的全过程?
构建基因表达载体的步骤不论动植物都是一样的。首先需要用工具酶剪切运载体上的DNA分子,然后用DNA连接酶将目的基因与被被切割的DNA分子连接。在这里的运载体有一定的要求,倘若不清楚可以追问。
载体构建目的 ①用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制(称为克隆)。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。
载体构建:将目的基因通过酶连接到一个特定质粒分子上,构成一个插入目的片段的新的质粒分子。 遗传转化:最简单的花序浸染,常用的农杆菌转化、基因枪轰击,还有花粉管通道等。
中间克隆载体:是构建中间表达载体的基础质粒。是由 大肠杆菌质粒插入T-DNA片段、目的基因和标记基因等构建 而成。 (3)中间表达载体:是含有植物特异启动子的中间载体。是 构建转化载体的质粒。
在一个典型的转基因植物生产过程中,这些步骤分别称为目的基因克隆、载体构建、转化、重组,以及筛选。基因克隆必须得有这个需要被转的基因。现在最广泛使用的BT蛋白基因和抗草甘膦基因,就来自于两种细菌。
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