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1. 目的基因重组表达载体的构建及在原核中的表达

1、目的基因重组表达载体的构建及在原核中的表达

目的基因重组表达载体的构建及在原核中的表达是生物技术领域的重要研究内容。目的基因重组表达载体的构建是将目的基因与适当的调控序列（如启动子、转录终止信号序列等）和标记基因连接在一起，形成重组表达载体。

用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS，然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接，用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表达质粒。

设计实现多基因串联重组原核表达载体的关键在于选择合适的基因、载体和重组方法，以确保基因在目标细胞中的高效表达和调控。 选择基因：首先，我们需要确定要串联重组的基因。

先克隆目的基因，比如PCR扩增。或者直接从其他载体酶切纯化 找到你所要的载体，一般可用TOPO TA载体来直接连接PCR产物。

过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

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