GFP报告载体构建,gfp报告系统的优缺点
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1、载体构建中常用的选择标记基因和报告基因是什么?
报告基因的主要作用是标记转化细胞,起报告和识别作用。常用的有Gus基因(β-葡萄糖苷酸酶基因),该基因来自大肠杆菌染色体上的uidA座位,编码β-葡萄糖苷酸酶。
标记基因:用于检测是否已经植入目的基因。植入的成功率其实很低,所以有必要选出已经植入的个体。比如抗虫棉,判断是否植入,用种植后让虫子吃的方法判断周期太长。
选择基因(又称选择标记基因),主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因,这种基因在执行其选择功能时,通常存在检测慢(蛋白酶作用需要时间)、依赖外界筛选压力(如抗生素、除草剂)等缺陷。
氨苄青霉素抗性基因:氨苄青霉素抗性基因(Ampicillin:resistance:gene,emphasis:role=italicampsuperscriptrsuperscriptemphasis)是基因操作中使用最广泛的选择标记,绝大多数在大肠杆菌中克隆的质粒载体带有该基因。
也可以用转化体提取液体,外用同位素标记,放射自显影筛选转化体。
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