构建载体用什么序列(构建载体需要的条件)
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1、真核生物表达载体关键序列有什么
GC box是真核生物基因顺式作用元件中的一种,其序列为GGGCGG或GGGCGGGG。通过与转录因子SP1结合,GC box可以调控基因的转录活性,进而影响基因的表达。
要有合适的启动子、SD序列等。一般表达载体上都会有,选择合适的载体就行。注意读码框。 去掉内含子。一般用cDNA。 注意翻译后的加工。如果你的蛋白有糖基化等修饰,就很麻烦,要改造宿主或干脆真核表达。
遗传标记: 从成千上万个哺乳细胞中,检测出极少数的含DNA重组体的转染细胞,并鉴定已导入外源DNA是哺乳动物细胞基因表达系统的一个关键内容。因此,在真核生物 表达载体上必须附有标记基因,才能进行筛选。
穿梭质粒载体这种质粒分子上含有两个亲缘关系不同的复制子结构以及相应的选择性标记基因,因此能在两种不同种属的受体细胞中复制并检测,例如既能在原核生物中复制,又能在真核生物中复制的载体。
单一序列 在整个基因组中只出现一次或少数几次的序列(也称为单拷贝序列或单拷贝基因),在小鼠中约占基因组的70%。如珠蛋白基因、卵清蛋白基因、丝心蛋白基因等。
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