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重组载体的构建是什么技术-重组载体构建结果与分析

重组载体的构建是什么技术-重组载体构建结果与分析

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  1. 植物基因工程的内容(基因克隆方法、连接、转化、筛选及鉴定)

1、植物基因工程的内容(基因克隆方法、连接、转化、筛选及鉴定)

目的基因制备和分离:一般通过文库筛选、同源序列比对等方法进行克隆。2)DNA重组载体的构建:选择植物表达载体,根据载体选择或添加酶切位点,然后进行酶切连接,构建重组载体。

在一个典型的转基因植物生产过程中,这些步骤分别称为目的基因克隆、载体构建、转化、重组,以及筛选。基因克隆必须得有这个需要被转的基因。现在最广泛使用的BT蛋白基因和抗草甘膦基因,就来自于两种细菌。

基因转化:将转基因载体导入植物细胞中。常用的基因转化方法包括生物质转化、农杆菌介导转化等。 选择转化植株:通过选择、筛选和鉴定转化后的植株,确定成功转化的植株。

人工合成——化学合成;PCR(聚合酶链式反应)接:DNA片段和载体DNA在体外链接,形成重组子。转:将重组的DNA进入宿主细胞。

①转化 转化的方法是利用一定浓度的氯化钙溶液处理细菌,使带有目的基因的重组质粒进入到宿主细胞中的过程。②转导 转导是指借助病毒、噬菌体或其他方法将外源DNA导入细胞并整合到宿主基因组上的方法。

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