大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于构建载体过程中基因截断的问题，于是小编就整理了1个相关介绍构建载体过程中基因截断的解答，让我们一起看看吧。

1. 构建重组载体时用两种限制酶切割目的基因的原因

1、构建重组载体时用两种限制酶切割目的基因的原因

为了防止目的基因和运载体自身环化。为保证目的基因正序插入运载体，防止反向连接。限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列，并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。

用不同限制酶切割的目的是：保证目的基因和质粒（运载体）的准确连接，避免无效连接（如：目的基因—目的基因连接物、质粒自身环化等）过多。

取下一段目的基因要切两次，也就是说这里切的两次可以分两种不同的酶来切，同样的，载体也需要切两次同样也是用这两种酶来切，这样有两组碱基的互补配对，就可以避免载体和载体配对以及目的基因和目的基因配对。

双酶切就是为了验证是否有目的基因，如果双酶切条带正确，而且PCR也没有问题，就可以确定质粒构建成功。质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段（10kb）且结构简单，质粒要比其它任何载体都要好。

降低了环化可能。如果切割位点为A-B-B之流，那仍旧可能自发环化。但位点由我们选择，可以规避以上情况。

到此，以上就是小编对于构建载体过程中基因截断的问题就介绍到这了，希望介绍关于构建载体过程中基因截断的1点解答对大家有用。