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1. 慢病毒质粒正向和反向

1、慢病毒质粒正向和反向

质粒在你插入的片段上游是有启动子区域的，在插入的时候有时由于是单酶切或者TA克隆或者平末端克隆，你是无法确定基因插入的方向的。

慢病毒载体系统由两部分组成，即包装成分和载体成分。 由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建，能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白。

肯定会有接反。只要两个粘性末端一样，就会有接反的。但是没有关系，我们只要有接正的就可以实验，就会有结果。如果不想接反，有两个办法。第一，你可以把读取用的启动子直接克隆在插入基因上，不管接正接反都可以读取。

构建 lncRNA 过表达质粒或者慢病毒、腺病毒包装载体。原则上是将全长lncRNA 定向克隆到表达载体上实现 lncRNA 的过表达。然而有些 lncRNA很大或全长尚未分离，这时将视 lncRNA 在基因组上的定位采取不同的研究策略。

翻译完整的流感病毒蛋白，能够提高流感病毒的拯救效率。protocol：克隆8质粒：使用含人类 polⅠ序列的 载体作为拯救系统的表达载体，构建8质粒拯救系统。

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