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1. 单酶切体系怎么设置

1、单酶切体系怎么设置

单酶切要想防止自连，最好的办法是把载体酶切产物脱磷酸。脱了磷酸的载体就无法自连，它只能和目的片段连接。如果不想脱磷，可以在连接反应体系中加大目的片段的数量，提高阳性克隆的比例，但这不能完全避免自连。

确认连接体系没有问题。2 确认设计引物的时候两边酶切位点的碱基和保护碱基没有问题。3 考虑PCR产物回收产物浓度提高一点。连T一般很容易的，我也做的单酶切连接，祝成功啦。

限制性内切酶是一种特殊的酶，它可以切割DNA分子的特定位置，并在这些位置形成切口，从而帮助进行DNA重组和操作。在配置酶切体系时，限制性内切酶的用量应该控制在适当的范围内，通常不超过整个体系的1/10。

关于酶切体系，酶切这个很多人还不知道，今天来为大家解答以上的问题，现在让我们一起来看看吧！电泳模糊先检查你的做胶问题。一定要等完全凝固了才能用。

单酶切的条件一般为：双酶切或多酶切时，需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液，然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择，可以在一种酶消化完毕后进行纯化，纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。

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