构建超表达载体所需的工具酶(构建表达载体的原理)
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1、cdna文库的构建所用的酶有哪些?
1. cdna文库的构建所用的酶有多种。
2. 首先,构建cdna文库需要使用逆转录酶,如M-MLV逆转录酶或SuperScript逆转录酶。
这些酶能够将mRNA模板逆转录成单链的cDNA。
3. 其次,构建cdna文库还需要使用DNA聚合酶,如Taq DNA聚合酶或Pfu DNA聚合酶。
这些酶能够在PCR反应中合成双链的cDNA。
4. 此外,还需要使用限制性内切酶,如EcoRI、BamHI等,用于在构建cdna文库的过程中进行DNA片段的切割和连接。
5. 还有其他一些辅助酶和试剂,如T4 DNA连接酶、DNA聚合酶I、DNA聚合酶I缓冲液等,用于辅助cdna文库构建的各个步骤。
6. 总的来说,构建cdna文库所用的酶包括逆转录酶、DNA聚合酶、限制性内切酶等,这些酶的作用是逆转录mRNA、合成cDNA和切割连接DNA片段。
反转录酶:以mRNA为模板反转录合成DNA。
限制性内切酶:酶切目的基因和载体,使其产生相同的粘性末端。
DNA连接酶:连接目的基因和载体。
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