大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于如何构建Donor载体的问题，于是小编就整理了3个相关介绍如何构建Donor载体的解答，让我们一起看看吧。

1. t载体可以作为donor质粒么
2. donor载体转化用多大浓度kan筛选
3. trapping的原理

1、t载体可以作为donor质粒么

PCR产物一般和 T载体相连，T载体是一种线性载体，和你的目的片段连接以后，就变成了 圆形的质粒。 T载体的种类很多，takara的书上有很多介绍。

空的DNA质粒，可以切割，插入DNA片段，可以转录表达。转基因的基本质粒之一。

t载体就是T-DNA，是一类可以重组到受体生物染色体上的载体，通常被应用于植物的基因重组过程中。由于PCR产物两侧3′端通常含单个脱氧腺苷酸（A），与T载体之间的A-T互补性可提高PCR产物克隆的效率。

获得目的基因后一般需要将目的基因连接到质粒载体上，在引物上加酶切位点可以使后续的连接过程简单、可控。因为可在载体和目的基因上酶切产生相同的切口。

我做过几个克隆，没用过T载体，直接将酶切后纯化的产物进行连接，照样可以连接成功，基本上都会有10-50个克隆长出来。我用的是Sal I和Nde I这两个酶切位点，似乎这两个都是平端的哦。

2、donor载体转化用多大浓度kan筛选

大多数质粒载体都是用抗菌素抗性标记，包括氨苄青霉素抗性（Ampr）、卡那霉素抗性（Kanr）、四环素抗性（Tetr）、链霉素抗性（Strr）和氯霉素抗性（Cmlr）等。

医院输液都可以用卡纳的，要是对细胞有毒的话这不是相当于杀人吗...质粒上的kan抗性只是为了连接之后转化涂板和摇菌时筛菌用的，不是转染之后筛细胞用的...如果筛细胞的话，要用puromycin或者G41..ps。

如果你转入农杆菌的质粒中含有Kan抗性，那么卡那就能够用于后期筛选。因为农杆菌转化出来的未必全是阳性的，使用抗生素可以进行初筛，减少假阳性。

你的KAN抗性基因已经被切掉了，所以不能加卡那了，要用Tetr抗生素。重组体可以在含有Tetr的平板生长，但不能再含有Kan的平板生长。

3、trapping的原理

trapped和trapping的区别是一个是一般进行时，一个是过去时.过去式（past tense），又称过去时，是英语语法的一种。它表示过去具体时间发生的动作或者是存在的状态。

溶解贮存机理（Solubility trapping） 是指CO2气体或超临界流体在地下流体中的溶解。CO2在水中的溶解随环境温度、压力和盐度的不同而变化。盐度在3%时，储层的溶解能力在47～51kg/m3间，相应孔隙体积的7%～3%是CO2。

若相邻对象的油墨颜色深浅度接近，而且处于中性密度范围，则两边颜色各扩张1/2的陷印值。3）当平网和实地交界处需做陷印时，平网向实地扩张（扩平网而不扩实地）。

按照间接印刷原理，印版通过橡皮布转印滚筒将图文转印在承印物上进行印刷的平版印刷机。

其原理都是引入压力油使轴套或侧板紧贴在齿轮端面上，压力愈高，间隙愈小，可自动补偿端面磨损和减小间隙。

关于如何构建Donor载体和构建载体是什么意思的介绍到此就结束了，不知道你从中找到你需要的信息了吗 ？如果你还想了解更多这方面的信息，记得收藏关注本站。 如何构建Donor载体的介绍就聊到这里吧，感谢你花时间阅读本站内容，更多关于构建载体是什么意思、如何构建Donor载体的信息别忘了在本站进行查找喔。