大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于miRNA成熟体构建载体的问题，于是小编就整理了1个相关介绍miRNA成熟体构建载体的解答，让我们一起看看吧。

1. 如何构建miRNA的表达载体

1、如何构建miRNA的表达载体

载体构建：定制microRNA过表达或抑制载体，以研究其生物学效应。 靶位点预测与荧光素酶载体构建：揭示miRNA潜在的靶基因，评估其功能影响。 转染后表达检测：包括细胞培养实验和分子生物学方法，全面揭示miRNA作用的动态。

稳定的细胞系必须小心地建立，采用病毒滴度测定来避免上述问题。Joshua Mendell（约翰霍普金斯大学）对于miRNA的上调，我们常常构建表达载体。制备起来非常简单。我们只是扩增miRNA发夹结构及一些侧翼序列，并直接克隆PCR产物。

双荧光素酶报告基因系统：该方法通过构建含有miRNA靶标位点的Luciferase报告基因载体，并将其转染至细胞中，然后共转染miRNA和Luciferase报告基因载体。

人工小分子RNA（artificial microRNA，amiRNA）技术，是利用天然miRNA生成和作用原理设计的，以一个或多个特定基因为靶标的小RNAs分子，它能够高效、特异地抑制基因的表达。

RAN–GTP和exportin 5将pre-miRNA输送到细胞质中。随后，另一个核酸酶Dicer将其剪切产生约为22个核苷酸长度的miRNA：miRNA*双链。

到此，以上就是小编对于miRNA成熟体构建载体的问题就介绍到这了，希望介绍关于miRNA成熟体构建载体的1点解答对大家有用。