构建载体有什么作用,构建载体容易出现的问题
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1、为什么要构建表达载体
构建基因表达载体的原因是因为如果没有表达载体,基因是无法进入目的细胞的,只需要记住在植入基因时构建载体即可。表达载体是必须构造的,一般为质粒(小型环状DNA)。
得到大量的DNA,虽然PCR也可以,但PCR扩增有出错率、但你每做一次常规的PCR,而且每次都要重新提DNA和RNA才行,而且,PCR反应的试剂盒又不便宜,用PCR来制备大量DNA有点得不偿失。
其构建使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。需要通过载体而不能直接将目的基因导入受体细胞的原因是基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子等结构,而目的基因没有。
基因表达载体 的构建的目的:使 目的基因 在 受体细胞 中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。组成:目的基因 启动子 终止子 标记基因 。
基因表达载体的构建,即目的基因和运载体结合,是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。
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